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外泌体分离试剂盒(沉淀法)

英文名:Exosome Isolation Kit (Precipitation)

货号:P-CA-505

价格:¥780 ¥1580¥¥

规格:
20 Tests
  • 20 Tests
  • 50 Tests
数量: - +
产品概述
产品描述 本产品是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。本试剂盒分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。
分离方法 聚合物沉淀法
产品优势 1. 适用样本广 血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都都适用;
2. 回收率高 相较于其他方法,获取的外泌体浓度高;
3. 操作简便 不需特殊设备,操作简便;
4. 快速 外泌体分离仅需1.5 h;
5. 重复性好 基本无操作熟练度要求;
6. 高通量 能同时处理多个样本。
运输条件 冰袋运输
保存条件 2-8℃
保质期 18个月
产品组分
规格 组分名称 含量 保藏温度
20 Tests/50 Tests Exosome Precipitation Solution 10 mL/25 mL 2-8℃
20 Tests/50 Tests Solution A 25 mL/25 mL 2-8℃
自备仪器耗材
高速冷冻离心机、离心管
使用方法

1. 准备工作
1) 将试剂盒中4℃保存组分(Exosome Precipitation Solution、Solution A)从冰箱拿出,恢复至室温。
2) 建议选择新鲜样本;如果样本保存在-80℃,请在37℃水浴锅中解冻,备用。
2. 样品预处理
1) 去除细胞。4℃,300 g,离心5 min,转移上清到新的离心管;
注意:对无细胞的样品,可以跳过此步骤。
2) 去除细胞及细胞碎片。4℃,2,000 g,离心10 min,转移上清到新的离心管;
3) 去除大体积颗粒。步骤 2)得到的上清,4℃,14,000 g,离心30 min,转移上清到新的离心管。
注意:去除大体积颗粒(大囊泡)的替代方法:将步骤 2)得到的上清,经0.2 μm微孔滤膜过滤,收集滤出液。
3. 沉淀外泌体
1) 根据外泌体样本类型,选择合适的操作方案:
血清、血浆外泌体样本操作方案
取预处理后样品500 μL到1.5 mL离心管,加入500 μL Solution A混匀,然后再加入250 μL Exosome Precipitation Solution,上下颠倒充分混匀;
注意:如果需要调整血清/血浆外泌体样品体积,可以按样本:Solution A:Exosome Precipitation Solution=2:2:1的体积比,等比例放大或缩小。
细胞培养上清、尿液外泌体样本操作方案
取预处理后样品1 mL到1.5 mL离心管,加入250 μL Exosome Precipitation Solution,上下颠倒充分混匀;
a. 若样品体积过大,可以浓缩到1-2 mL后,再进行该步骤。
b. 如果需要调整细胞培养上清/尿液外泌体样品体积,可以按样本:Exosome Precipitation Solution=4:1的体积比,等比例放大或缩小。
2) 室温孵育30 min (快速流程);
注意:如果时间充裕,推荐4℃ 孵育过夜 (高回收流程)。
3) 置于离心机4℃,12,000 g离心30 min,弃上清。
注意:吸弃或小心倾倒上清后,用200 μL移液器尽可能吸净上清。
4. 回收外泌体
1) 外泌体重悬。向上述沉淀中加入200 μL Solution A,用移液器轻柔上下吹打混匀;
2) 收集外泌体颗粒。将重悬液转移至新的1.5 mL离心管,4℃ 12,000 g 离心5 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。
注意:若沉淀较多,取离心后上清液,12,000 g,5 min,离心多次,直至无明显沉淀,获取上清液即为外泌体。
3) 分离的外泌体可立即开展后续实验。24 h内进行后续实验,可4℃保存;否则分装后保存在-80℃。

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