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细胞学堂 | L-929细胞培养秘籍:新手也能轻松搞定!

来源:Pricella  浏览量:  发布时间:2025-02-28 14:00:00

L-929 细胞作为最早成功建立并得以广泛应用的永生化细胞系之一,在细胞生物学、病毒学、免疫学和毒理学等多个领域具有重要的研究价值。


本期细胞学堂将为大家详细介绍L-929细胞的基本信息、培养过程中的注意事项,以及在巨噬细胞研究中的应用,帮助您快速掌握培养细胞技巧,顺利开展实验。

01#

细胞背景

L-929细胞的全称是NCTC clone 929,源自1948年,由WR. Earle等人从一只100天大的雄性C3H/An小鼠的皮下结缔组织分离出成纤维细胞并建立[1]。在其名称中,“L“代表该细胞组织来源于疏松结缔组织(Loose Connective Tissue) ,“929”则是其建系时的编号。

L-929细胞的使用历史悠久,在研究过程中衍生出了一系列的细胞,最常用的包括L-M[TK-]细胞A9细胞L Wnt-3A细胞以及L-WRN细胞等。

02#

细胞基本信息

别称:NCTC-929L; L cell; Strain L-929; L929(NCTC); Clone 929; Earle's L cells等

生长特性:成纤维细胞样,贴壁生长

倍增时间:28-36 h

培养条件

MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S

气相:空气,95% ;CO2,5%

温度:37℃

换液频率:2-3次/周

传代比例:1:3-1:4

03#

培养注意事项

L-929细胞通常用10%的胎牛血清培养,但实际上,使用10%的马血清也能满足其正常生长需求。在这两种血清的培养条件下,L-929细胞在形态和生长速度上未表现出明显差异。

L-929细胞具有很好的适应性,能够在不同类型的基础培养基(如常见的DMEM、MEM以及RPMI-1640等)中生长。但需要注意的是,替换基础培养基时需要经过一定的适应和驯化阶段,以确保细胞能正常生长。

L-929细胞对于血清非常敏感。当血清质量不佳时,细胞形态和生长状态可能发生变化,例如变为圆形(如图1),或增殖速度变慢,甚至停滞。

L-929细胞正常生长形态和因血清质量差导致细胞变圆

图1. L-929细胞正常生长形态和因血清质量差导致细胞变圆

04#

在巨噬细胞研究中的应用

L-929细胞不仅在基础细胞生物学中有广泛应用,还在免疫学和炎症研究中发挥着重要作用。L-929细胞具备分泌巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的能力,这一因子是诱导骨髓单核细胞分化为成熟巨噬细胞的关键因子。此外,L-929细胞还可分泌多种细胞因子,如MIF、CCL2、CCL7等,协同促进巨噬细胞的分化和成熟[2]。使用L-929细胞条件培养基培养的巨噬细胞,生物学特性通常优于直接提取的成熟巨噬细胞[3],因此被广泛应用于免疫学和炎症研究中。

L-929细胞条件培养基制备方法


将L-929细胞接种于T75培养瓶,使用L-929细胞完全培养基培养7-10天;

收集培养上清液,通过高速离心或过滤去除细胞碎片;

将上清液分装,存储于-20℃或-80℃冷冻保存;

使用时,按照20-30%的比例添加至含10%血清的完全培养基中。




L-929细胞在细胞生物学和免疫学研究中的广泛应用,使其成为研究者不可或缺的工具。在培养过程中,确保细胞培养条件的适宜性以及血清质量的稳定性,能够有效保证细胞的健康生长。此外,L-929细胞在巨噬细胞研究中的应用,为免疫学实验提供了有力支持。为帮助大家更好地开展相关实验,普诺赛提供了L-929细胞及其专用培养基,一站式培养细胞,助您科研无忧!


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以上是关于L-929细胞的基本信息介绍、培养注意事项及应用的解析,更多细胞培养干货,请持续关注细胞学堂专栏~


参考文献

[1] 

Katherine K. Sanford, Wilton R. Earle, Gwendolyn D. Likely. The Growth in Vitro of Single Isolated Tissue Cells. Journal of the National Cancer Institute, 1948 Dec; 9 (3):229-246.

[2] 

Heap RE, Marín-Rubio JL, Peltier J, et al. Proteomics characterisation of the L929 cell supernatant and its role in BMDM differentiation [J]. Life Science Alliance, 2021 Apr 14; 4(6):e202000957.

[3] 

Wang W, Qin Y, Wang YR, et al. Characteristic comparison of mouse primary macrophages cultured in L929 cell conditioned medium [J]. Chinese Journal of Biotechnology, 2020, 36(7): 1431-1439.

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