Mergene1000® MCF7细胞专用DNA转染试剂

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Mergene1000^®MCF7细胞专用DNA转染试剂是一款性能优良的DNA转染试剂，可用于质粒DNA的传送。它具有较强的DNA转染能力，专用于MCF7细胞，可得到较高转染效率，具有毒性低、稳定性好、操作简单易行、重复性好等优点。

产品信息

产品简易操作流程图

产品使用步骤

以24孔板为例，Mergene1000^® MCF7细胞专用DNA转染试剂（μL）与质粒DNA（μg）按照2.5:1比例混合，可根据情况在1:1到5:1的比例之间调整。其它规格培养板或培养皿可参考表1的转染推荐量。 

l细胞铺板

转染前一天，每孔加入500 μL MEM（含NEAA）＋10 μg/mL Insulin＋10% FBS＋1% P/S完全培养基，接种1.2×10⁵个细胞/孔，细胞培养24 h，可针对细胞实际状态适当调整培养时间，使转染时细胞密度达到60%-70%的融合度。

l转染复合物制备

1. 准备2个无菌离心管，取一管加入0.4 μg质粒和MEM（含NEAA）基础培养基，终体积为10 μL，轻轻吹打混匀；另一管加入1.0 μL Mergene1000^® MCF7细胞专用DNA转染试剂和9.0 μL MEM（含NEAA）基础培养基，终体积为10 μL，吹打混匀后室温孵育5 min。（以上是针对每孔细胞的制备量，请根据您的具体实验条件和需求，计算实验所需的制备量。）

2. 将上述两管等体积稀释液混合，轻轻吹打混匀，室温静置20 min。

l细胞转染

1. 将制备的20 μL复合物逐滴加到细胞中，采用8字法混匀细胞培养板，放置37℃，5% CO₂培养箱培养。

2. 培养18-48 h后检测基因表达。

               表1 MCF7细胞不同培养容器转染参考用量

【注】该表使用量仅供参考，DNA与Mergene1000^®MCF7细胞专用DNA转染试剂具体使用量还需根据细胞状况及其他实验条件进行优化。

注意事项

1. 以上步骤中的细胞接种量、转染比例是实验室基于MCF7细胞摸索的结果，仅供参考。具体实验用量可根据实际情况进行调整。

2. 该产品常温运输，使用时可分装保存，避免多次长时间开盖。

3. 需自备MEM（含NEAA）基础培养基，用以稀释质粒DNA和转染试剂。

4. 转染操作时，应确保细胞融合度不低于60%，一般维持在60%至70%左右为宜。具体铺板密度可根据细胞的实际情况进行调整。

5. 转染后不需要除去转染复合物或更换新鲜培养基。实际操作可根据细胞状态，转染后培养4-6 h选择更换培养基。

6. 使用高纯度的无内毒素DNA有助于获得较高的转染效率。

7. 初次使用应优化质粒浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

8. 本产品仅限于专业人员的科研用途。

9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套无菌操作。

实验结果展示（仅供参考）

图1. Mergene1000^® MCF7细胞专用DNA转染试剂用EGFP表达质粒转染MCF7细胞的实拍明场和荧光照片。

图2. Mergene1000^® MCF7细胞专用DNA转染试剂用EGFP表达质粒转染MCF7细胞的转染效率。

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