PC-12未分化、低分化、高分化的区别及应用

PC-12 嗜铬细胞瘤系是源自大鼠肾上腺髓质肿瘤的克隆系，分为未分化、低分化、高分化3种。三者的最大的区别主要在形态上。

未分化的PC12细胞从形态上看是圆形的、聚团生长的悬浮细胞；低分化的成多角形、有较短的突起；高分化的细胞有多个突起，突起数目不等，突触较长，类似神经元轴突。

PC12细胞未分化，和ATCC 货号为CRL-1721细胞相同。

低分化和高分化是在未分化的PC12细胞基础上诱导产生的，低分化和高分化指的是与神经细胞表型的相似程度，高分化更接近神经细胞表型。

PC12未分化

阿尔茨海默病 (AD)、帕金森病 (PD)、肌萎缩侧索硬化症和亨廷顿病等神经退行性疾病的标准治疗可恢复神经递质的平衡，从而使神经运动功能正常。虽然大多数药物方案可以改善病人的生活质量，但它们并没有解决潜在病因，因此不会阻止身体的退化过程。

虽然神经生长因子 (NGF) 、脑源性神经营养因子 (BDNF) 和神经营养因子-3/神经营养因子-4等营养分子的内源性合成可以有效地刺激神经元生长、修复 ，但治疗应用受限于广泛的副作用，例如神经性疼痛 、膀胱疼痛、泌尿疼痛、皮肤瘙痒 (瘙痒) 特应性皮炎 、 深层组织压痛 、炎症恶化如关节炎、哮喘 、椎间盘退变和癌症。

此外，各种神经元组织中 NGF 水平升高会导致行为障碍和认知障碍，例如自闭症 、双相情感障碍和注意力缺陷、多动障碍。鉴于 NGF 的不良全身效应，似乎需要在小分子 NGF 模拟物的鉴定和开发方面开展研究工作。

只有少数已知的 NGF 模拟物，如 GK-2 h，它们在实验模型中显示出促进神经元存活、分化和突触可塑性的能力，需要筛选多种天然植物提取物和多酚类物质，在大鼠多巴胺能嗜铬细胞瘤 PC12细胞 中发挥 NGF 相同作用的物质。

a. 高通量筛选 1144 种植物多酚类药物、合成/对照药物（包括塞来昔布、布洛芬、紫杉醇等）和 947 种常用药草和香料的水提取物，在 PC-12 细胞中相对于 NGF 诱导神经突生长的能力，在胶原蛋白包被板上超过 7 天。在初始筛选中，随后使用全剂量范围进行验证，仅阐明了一种阳性 NGF 模拟物。

b. 7天时PC12细胞神经突生长的形态学分析；对照（上）NGF 0.5 μg/mL（中）和 MCS 提取物（150 μg/mL）（下）

建立细胞模型，常用PC-12未分化细胞，用NGF（神经生长因子）诱导，可以使细胞出现交感神经细胞样改变，用于后续的研究。通过多篇文献的研究，最佳的NGF的浓度为50ug/L，作用时间为48h，100mmol/L的乙醇可以增强NGF的诱导作用。

涉及到的信号通路是MAPK，ERK总蛋白在NGF作用前后无明显变化，作用5分钟后，磷酸化p-ERK蛋白显著升高，达到峰值，推测是为整个分化提供起始信号，进程一旦启动，会被迅速降解。

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