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细胞学堂 | 培养K7M2-WT细胞，千万不要错过这些知识
来源：Pricella 浏览量： 发布时间：2022-04-08 10:20:02
K7M2-WT(小鼠骨肉瘤成骨细胞)在Balb/c小鼠中形成肿瘤，在超过90%的接种小鼠中自发转移到肺部。K7M2-WT细胞抗原表达：Ⅷ因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、二聚糖、饰胶蛋白聚糖、绒毛蛋白。此外，骨唾液酸蛋白、二聚糖、饰胶蛋白聚糖和骨调素的表达显示K7M2-WT细胞骨家族细胞特性。
基础信息
生长培养基 | |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~31小时 |
细胞形态 | 成骨细胞样 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
冻存条件 | 55% 基础培养+40%FBS+5%DMSO |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
细胞复苏
01
02
03
04
细胞冻存
01
02
03
04
05
细胞传代
1
将培养基吸出丢弃，加入2mL PBS润洗；
2
吸出PBS丢弃，加入2mL胰酶润洗；
3
放入培养箱消化2-3分钟，轻拍培养皿侧壁，看到细胞脱壁且聚集的细胞团松散开后，加入2mL完全培养基终止消化；
4
将细胞轻柔吹打，使细胞混匀为悬浮液，根据需求进行接种。
小贴士
细胞密度不能太低；
润洗时要注意将所有细胞都浸润到。
图1. K7M2-WT细胞正常生长
培养注意事项
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